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第三，通过体外 TNAP 切割实验和体内肝脏过表达 GPLD1 实验，证实 TNAP 是 GPLD1 的直接底物，GPLD1 可切割并降低老年小鼠海马血管的 TNAP 表达与活性，也就是说运动诱导的肝脏 GPLD1 能精准作用于脑血管的 TNAP 蛋白。
此外，研究人员目前并不能解释为何规律的有氧运动能让人的大脑保持更年轻状态。研究团队分析了多种可能的影响因素，包括体能提升、身体成分变化、血压波动，以及脑源性神经营养因子（一种参与大脑可塑性调节的蛋白质）水平变化。但这些因素都无法解释研究中观察到的有氧运动降低大脑预测年龄的现象。也许是一些尚未发现的机制造成了这种结果，如大脑结构的细微变化、炎症反应的调节、血管健康的改善，或是其他分子机制。
最后，该项研究持续了一年，共招募了130名年龄在26-58岁的健康成年人。受试者随机分为两组：中高强度有氧运动组和常规护理对照组。有氧运动组的受试者每周在实验室完成两次专业指导下的60分钟有氧训练，同时配合居家锻炼，使每周的有氧运动量达到约150分钟，这一运动量与美国运动医学学会的建议标准相符。
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